1926年中共中央调罗到上海,担任中共江浙区委书记。为迎接革命浪潮到来,罗组织工人从经济罢工入手,进而准备武装起义。其积极于各种行业中发展党员,建立党的基层组织,恢复各种产业工会,组织和训练工人纠察队,为起义作各种准备。
赵世炎于中共在广州召开的第三次全国劳动代表大会后,被任命为江浙区委兼上海区委组织部长和上海总工会党团书记,其抵上海后,即深入到工人之中,组织罢工斗争,准备武装起义,迎接北伐。
5月,江浙区委决定组织“五卅”周年纪念日示威活动。这天,赵亲自在南京路上指挥6万多工人群众举行了示威游行,此举震惊了帝国主义,租界的巡捕开来铁甲车,并用高压水龙头喷射。游行工人奋力相抗。事后,赵发表了《五卅周年纪念的教训和上海民众的责任》一文。
5月之后,帝国主义及资本家向工人进行反扑,他们任意开作、逮捕和处死工人群众。赵及时分析了形势,认为罢工时机已经成熟,上海的工人运动应由防御转入进攻。在赵世炎和总工会其他同志的具体组织和指挥下,上海工人大罢工序幕拉开。
大罢工斗争先从上海纱厂女工开始。接着,上海各工厂全面展开。仅6月份,全上海就爆发了107次罢工。参加罢工群众达7万人之多。把上海变成了“运动的上海”。为此赵世炎发表了《上海最近罢工潮》一文。